НАХОЖДЕНИЕ АНИЗОТРОПИИ ПОЛЯРИЗАЦИИ ФЛУОРЕСЦЕНЦИИ ПО ЦИФРОВЫМ МИКРОИЗОБРАЖЕНИЯМ КЛЕТОК
И.Г. Пальчикова1,2, Л.В. Омельянчук3, Н.В. Каманина4, С.Н. Макаров1,2, Е.С. Смирнов1,2
1Конструкторско-технологический институт научного приборостроения СО РАН, 630058, г. Новосибирск, ул. Русская, 41
palchikova@tdisie.nsc.ru
2Новосибирский государственный университет, 630090, г. Новосибирск, ул. Пирогова, 2
makarov@tdisie.nsc.ru
3Институт молекулярной и клеточной биологии СО РАН, 630090, г. Новосибирск, просп. Академика Лаврентьева, 10
ome@mcb.nsc.ru
4ОАО «Научно-производственная корпорация "Государственный оптический институт им. С. И. Вавилова"», 199034, Санкт-Петербург, Биржевая линия, 12
nvkamanina@mail.ru
Ключевые слова: цифровая обработка микроизображения, анизотропия поляризации флуоресценции, гомо-FRET, белки, маркированные GFP
Страницы: 102-110
Подраздел: ОПТИЧЕСКИЕ ИНФОРМАЦИОННЫЕ ТЕХНОЛОГИИ
Аннотация
Созданы методы регистрации и обработки микроизображений, пригодные для получения количественной информации об анизотропии поляризации флуоресценции, вызванной резонансным транспортом энергии между белками, маркированными GFP (Green Fluorescent Protein) в живой клетке. Рассматриваемые методы позволяют с высокой точностью детектировать димеры и ассоциаты более высоких порядков для белков, маркированных GFP. Зарегистрировано белок-белковое взаимодействие, возникающее между субъединицами в тримерном белке GFP. Выявлены источники аппаратных неточностей, найдены пути их устранения, что позволило уменьшить коэффициенты вариации данных на порядок по сравнению с полученными ранее.
|
