ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ БЕЛКА В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ ПО СПЕКТРАМ КОМБИНАЦИОННОГО РАССЕЯНИЯ СВЕТА
С.С. Пудова1, Н.В. Суровцев1, М.А. Суровцева2
1Институт автоматики и электрометрии СО РАН, Новосибирск, Россия s.pudova@g.nsu.ru 2Научно-исследовательский институт клинической и экспериментальной лимфологии - филиал ФИЦ Институт цитологии и генетики СО РАН, Новосибирск, Россия mfelde13@yandex.ru
Ключевые слова: комбинационное рассеяние света, кондиционированные жидкости, белок-репортёр, концентрация белка, трихлоруксусная кислота
Страницы: 86-94
Аннотация
Исследованы возможности методики определения концентрации белка в биологической жидкости по спектрам комбинационного рассеяния света сухого остатка после испарения воды в случае, когда доля белка в жидкости мала по сравнению с небелковыми компонентами. Для подавления вкладов в спектр комбинационного рассеяния света от небелковых органических веществ предлагается использовать осаждение белка трихлоруксусной кислотой в жидкости перед получением сухого остатка. Для получения количественного значения массовой доли белка предлагается использовать добавление в жидкость белка лизоцима, обладающего уникальными особенностями в спектре комбинационного рассеяния света. Показано, что анализ спектров комбинационного рассеяния света сухого остатка с лизоцимом, осаждённого трихлоруксусной кислотой, позволяет определять массовую долю белка в диапазоне от 0,03 мг/мл и выше. Методика также апробирована на примере кондиционированных жидкостей после культивирования фибробластов и миофибробластов роговицы, и показана возможность получения достоверных значений концентрации белка.
DOI: 10.15372/AUT20260408 |