Главная – Журналы – Сибирский научный медицинский журнал 2019 номер 4

Эпидемия ВИЧ-1 является одной из самых острых проблем мирового здравоохранения. По ряду причин эффективной вакцины против этой инфекции на данный момент не создано. В настоящее время важным направлением в разработке вакцины против ВИЧ/СПИДа является конструирование иммуногенов, которые были бы способны индуцировать антитела, нейтрализующие широкий спектр штаммов ВИЧ-1 (bNAbs). Одним из подходов создания таких иммуногенов является конструирование химерных вирусоподобных частиц (VLPs), экспонирующих эпитопы, узнаваемые bNAbs. Целью исследования являлись получение и характеризация химерных VLPs на основе HBcAg, экспонирующих эпитопы, узнаваемые bNAbs 2F5 и 4E10. Материал и методы. Штаммы-продуценты химерных вариантов HBcAg получали путем трансформации клеток Escherichia coli BL21 рекомбинантными плазмидами, несущими гены HBcAg и содержащими встройки, кодирующие эпитопы bNAbs 2F5 и 4E10. Очистку рекомбинантных белков проводили с помощью гель-фильтрации на колонке с сефарозой CL-6B. Способность рекомбинантного HBcAg образовывать вирусоподобные частицы оценивали с помощью электронной микроскопии. Антигенные свойства эпитопов в составе химерных вариантов HBcAg анализировали с помощью иммуноблотинга. Результаты. Получена модифицированная нуклеотидная последовательность гена HBcAg , в состав которой были введены уникальные сайты рестрикции, фланкирующие район главной антигенной детерминанты кора. На основе данной генетической конструкции получены три рекомбинантные плазмиды, кодирующие химерные варианты НВсAg, включающие эпитопы bNAbs 2F5 и 4E10. С помощью иммуноблотинга установлено, что эпитопы, узнаваемые bNAbs, сохраняют свои антигенные свойства в составе химерных НВсAg.

http://sibmed.net/article/732/snmzh_4-2019_rudometov_55-61.pdf