ОДНОВРЕМЕННОЕ ВОЗДЕЙСТВИЕ НЕСКОЛЬКИМИ АНТИСМЫСЛОВЫМИ ОЛИГОНУКЛЕОТИДНЫМИ ПРОИЗВОДНЫМИ, ЕГО ЭФФЕКТИВНОСТЬ НА ПРИМЕРЕ ЛИПИДНОГО ОБМЕНА МЫШИ
С.И. Ошевский1, Ю.И. Рагино2, Е.В. Каштанова2, Я.В. Полонская2, Е.М. Стахнева2, В.П. Николин1, Н.А. Попова1, А.Н. Кораблев3, Н.А. Колчанов1, М.И. Воевода1,2,3
1ФГБНУ «Федеральный исследовательский центр Институт цитологии и генетики» СО РАН, 630090, г. Новосибирск, просп. Академика Лаврентьева, 10
oshevski@bionet.nsc.ru
2ФГБНУ «НИИ терапии и профилактической медицины», 630089, г. Новосибирск, ул. Бориса Богаткова, 175/1
ragino@mail.ru
3Новосибирский национальный исследовательский государственный университет, 630090, г. Новосибирск, ул. Пирогова, 2
korablevalexeyn@gmail.com
Ключевые слова: антисмысловые олигонуклеотидные производные, регуляция липидного обмена, antisense oligonucleotide derivatives, lipid metabolism regulation
Страницы: 72-78
Подраздел: Оригинальные статьи
Аннотация
Цель исследования: на примере мыши показать возможность регуляции липидного обмена одновременным воздействием несколькими антисмысловыми олигонуклеотидными производными (АСО), адресованными на мРНК близко взаимосвязанных и задействованных в регуляции липидного обмена белков. Материал и методы: самки мышей линии C57BL/6J, олигонуклеотидные производные длиной 13 и 20 нуклеотидов, защищенные от действия нуклеаз наличием межнуклеотидных фосфоротиоатных связей и блоками LNA-нуклеотидов (Locked nucleic acids) на 5′- и 3′-концах; стандартные методы количественного определения аполипопротеидов: апоВ и липопротеидов: холестерина липопротеидов высокой плотности (ХС ЛПВП), холестерина липопротеидов низкой плотности (ХС ЛПНП), общего холестерина (ХС), триглицеридов (ТГ) и аланинаминотрансферазы (АЛТ) в сыворотке крови. Результаты: растворенные в физиологическом растворе АСО в комбинациях: (1) АСО к апоВ, (2) АСО к апоВ и АСО к PCSK9, (3) АСО к апоВ, АСО к PCSK9 и АСО к апоCIII вводили в хвостовую вену мышам линии C57BL/6J по четыре раза. После трехкратного еженедельного введения АСО в комбинации (3) уровень ХС ЛПНП относительно контроля снижался на 25 % и на 42 % улучшалось соотношение ХС ЛПВП/ХС ЛПНП. При последующем введении АСО с одновременным переходом на жировую диету, через неделю в случае комбинаций (2) и (3) уровень ХС ЛПНП был в 1,5 и 3,5 раза ниже, чем в контроле, а соотношение ХС ЛПВП /ХС ЛПНП лучше в 2 и 5 раз соответственно. Одновременно в случае комбинаций (2) и (3) наблюдалось существенное снижение концентрации ТГ, которое достигало почти двукратного в комбинации (3). Данные эффекты проявляются при трехкратном увеличении содержания жира в рационе животных. Концентрация АЛТ существенно снижалась при переходе от комбинации (1) к комбинации (3), т.е. при увеличении нагрузки на печень олигонуклеотидного материала, что указывает на отсутствие гепатотоксического эффекта. Заключение: на примере липидного обмена показана возможность эффективного регуляторного воздействия сразу несколькими антисмысловыми олигонуклеотидными производными, адресованными на мРНК взаимосвязанных белков.
|
