Использование аполипопротеина А-I в качестве компонента бессывороточной питательной среды для культивирования клеток костного мозга
А.Ю. Городецкая, Т.А. Ткаченко, А.Н. Дударев, И.О. Чешенко, И.Ф. Усынин
НИИ биохимии ФИЦ фундаментальной и трансляционной медицины, Новосибирск, Россия a.pe4enkina@yandex.ru
Ключевые слова: аполипопротеин А-I, культура клеток, клетки костного мозга, бессывороточная питательная среда, биосинтез ДНК, apolipoprotein A-I, cell culture, bone marrow cells, serum-free culture medium, DNA synthesis
Страницы: 20-27
Аннотация
Важным этапом в производстве препаратов для клеточной терапии и тканевой инженерии является культивирование клеток in vitro . Цель данной работы - исследовать влияние человеческого аполипопротеина А-I (апо A-I) на функциональную активность культивируемых клеток костного мозга и показать возможность использования данного белка в качестве компонента бессывороточной питательной среды. Материал и методы. Клетки костного мозга культивировали в 24-луночных планшетах в среде RPMI-1640 в СО 2-инкубаторе при температуре 37 °С. В качестве интегрального показателя жизнеспособности клеток в процессе культивирования определяли уровень биосинтеза белка и ДНК по скорости включения [ 14С]-лейцина и [ 3Н]-тимидина в общий белок и ДНК соответственно. Результаты и их обсуждение. Установлено, что скорость биосинтеза ДНК в присутствии апо A-I была выше, чем в его отсутствие, на 55 % через 8 ч, на 523 % через 24 ч и на 219 % через 48 ч. В этих условиях также возрастала скорость биосинтеза общего белка. Полученные результаты свидетельствуют о том, что наличие апо A-I в бессывороточной питательной среде сохраняет функциональную активность культивируемых клеток костного мозга. Учитывая, что регуляторный эффект апо A-I достигается при небольшой концентрации белка (15 мкг/мл), использование апо A-I, выделенного из сыворотки крови пациента, позволит получить практически безопасную питательную среду для культивирования аутологичных клеток костного мозга в целях персонифицированной клеточной терапии и тканевой инженерии.
http://sibmed.net/article/835/snmzh_4-2020_gorodeckaya_i_dr.pdf
DOI: 10.15372/SSMJ20200403 |