Издательство СО РАН

Издательство СО РАН

Адрес Издательства СО РАН: Россия, 630090, а/я 187
Новосибирск, Морской пр., 2

soran2.gif

Baner_Nauka_Sibiri.jpg


Яндекс.Метрика

Поиск по журналу

Сибирский научный медицинский журнал

2019 год, номер 3

ХАРАКТЕРИСТИКА КУЛЬТУР КЛЕТОК, ПОЛУЧЕННЫХ ИЗ ЛИМБА ЧЕЛОВЕКА

М.А. СУРОВЦЕВА1, И.А. ИСКАКОВ2, О.В. ПОВЕЩЕНКО1, А.П. ЛЫКОВ1, И.И. КИМ1, Е.В. ЯНКАЙТЕ1, В.И. КОНЕНКОВ1, В.В. ЧЕРНЫХ2
1НИИ клинической и экспериментальной лимфологии - филиал ФИЦ Институт цитологии и генетики СО РАН
mfelde@ngs.ru
2МНТК «Микрохирургия глаза» им. академика С.Н. Федорова Минздрава России, Новосибирский филиал
iskakov@mntk.nsk.ru
Ключевые слова: лимб, эксплант, амниотическая мембрана, лимбальные стволовые клетки, мультипотентные мезенхимальные стволовые клетки, limb, explant, amniotic membrane, limbal stem cells, multipotent mesenchymal stem cells
Страницы: 15-20

Аннотация

В лимбе локализованы лимбальные эпителиальные стволовые клетки, которые обеспечивают регенерацию эпителия роговицы, как физиологическую, так и репаративную. Целью данной работы являлась характеристика клеточных культур, полученных из лимбального графта человека различными методами. Материал и методы. Лимбальные стволовые клетки получали из области лимба энуклеированных глаз человека ферментативным методом и методом экспланта. Культивирование клеток осуществляли на амниотической мембране и без нее, в ростовых средах DMEM/F12 (Dullbecco’s Modified Eagle Medium/Nutrient F12 Ham) и CECBM (Corneal Epithelial Cell Basal Medium). Проведена морфологическая оценка и иммунофенотипирование клеточных культур. Результаты и их обсуждение. При ферментативном методе выделения полученная культура клеток отличалась гетерогенностью, в суспензии неадгезированных клеток выявлено присутствие фибробластоподобных клеток, которые по внешнему виду и характеру роста напоминали стромальные. При иммунофенотипировании выявлено, что большинство клеток несут маркеры мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (CD90+/CD73+/CD105+/CD34-/CD45-) и меньшее количество - маркеры эпителиальных клеток (p63α+, ABCG2+, CK19+). Культура, полученная методом экспланта, была более однородной. Клетки имели округлую эпителиоцитоподобную форму, хорошо адгезировались к поверхности амниотической мембраны и росли на ней. Результаты фенотипирования свидетельствуют, что они представлены главным образом эпителиальными клетками (p63α+, ABCG2+, CK19+). Заключение. При ферментативном методе выделения клеток из лимбального графта и культивировании их без фидера в ростовой среде DMEM/F12 культура представлена главным образом мультипотентными мезенхимальными стволовыми клетками. Выделение клеток лимба методом экспланта и культивирование их в селективной среде CECBM позволяют получить преимущественно культуру эпителиальных стволовых клеток.

http://sibmed.net/article/706/snmzh_3-2019_surovceva_15-20.pdf

DOI: 10.15372/SSMJ20190302